密閉熏蒸消毒是目前國內高等級生物安全實驗室常用的消毒方式，以試驗室房間為單元，關閉送排風機組、風管密閉閥和實驗室門，是實驗室處于密閉狀態(tài)，在房間內發(fā)生消毒劑氣體或房間外發(fā)生消毒劑氣體通過專用消毒管道注入實驗室。

在房間內發(fā)生消毒劑氣體的密閉熏蒸消毒方法：將消毒設備主機推進待消毒的實驗室內，微電腦控制臺放在輔助區(qū)的某房間內，數(shù)據(jù)線經(jīng)墻體孔洞穿管接出或通過傳遞窗接出，傳遞窗周邊縫隙用無殘留膠布密封。

在房間外發(fā)生消毒劑氣體的密閉熏蒸消毒方法：消毒設備主機放置在實驗室外，將消毒劑氣體注入口和氣流返回口與墻體上固有的消毒口連接。為保證實驗室內消毒氣體分布均勻及充分交換，可進一步采用塑料管連接墻體上的消毒劑氣體注入口，將塑料管另一端深入實驗室中心位置，高度50~100cm，注入口和返回口相隔距離約2.5m，實驗室內兩對角放置兩臺可左右旋轉的電風扇。此消毒方式也可設置特定的消毒管道接入房間頂棚，在頂棚接管處設置消毒劑噴頭。

以上兩種密閉熏蒸消毒方式，鑒于房間內發(fā)生消毒劑氣體的方法在操作時需要將消毒設備主機推入房間，因此在大多數(shù)情況建議使用房間外發(fā)生消毒劑氣體的方法進行密閉熏蒸消毒。

密閉熏蒸消毒存在一定的風險：采用密閉熏蒸消毒時，若存在多個核心工作間，當沒有多個消毒設備可以同時進行消毒時，消毒中、消毒后和未消毒的房間存在彼此污染的風險，甚至會污染吊頂、外圍走廊等周圍環(huán)境。因此應根據(jù)實際情況進行風險分析，當風險較大時，應采取相關措施降低風險。對于國內常規(guī)的三級生物安全實驗室，在沒有意外事故發(fā)生時，正常情況下室內被污染的概率較??；實驗室密閉熏蒸消毒時從圍護結構縫隙泄漏出來的空氣量較少，而且大部分實驗室在進行消毒時，一般會用膠帶密封實驗室門縫及其他課件縫隙來降低泄漏概率。根據(jù)國內多數(shù)三級生物安全實驗室的多年實踐，一般情況下密閉熏蒸消毒時上述一些潛在的生物安全風險在可接受范圍內。生物安全防護級別較高的大動物三級生物安全實驗室及四級生物安全實驗室對圍護結構氣密性要求較高，需要進行恒壓法、壓力衰減法氣密性驗證，當采用密閉熏蒸消毒模式時，實驗室圍護結構的高度氣密性對降低污染物外泄風險有重要意義。

參考文獻《生物安全實驗室設計與建設》。

蘇州凱爾森